梯度洗脫又稱為梯度淋洗或程序洗脫。在同一個(gè)分析周期中，按一定程度不斷改變流動(dòng)相的濃度配比，稱為梯度洗脫。
梯度洗脫要求：
梯度洗脫可分為低壓梯度(又稱為外梯度)和高壓梯度(又稱為內(nèi)梯度)。
(1)低壓梯度裝置。低壓梯度是采用比例調(diào)節(jié)閥，在常壓下預(yù)先按一定的程序?qū)⑷軇┗旌虾�，再用泵輸入色譜柱系統(tǒng)，也稱為泵前混合。
(2)高壓梯度裝置。由兩臺(tái)(或多臺(tái))高壓輸液泵、梯度程序控制器(或計(jì)算機(jī)及接口板控制)、混合器等部件所組成。兩臺(tái)(或多臺(tái))泵分別將兩種(或多種)極性不同的溶劑輸入混合器，經(jīng)充分混合后進(jìn)入色譜柱系統(tǒng)。
分級(jí)梯度洗脫：
分級(jí)梯度洗脫是依據(jù)各種離子或離子化合物與離子交換劑的結(jié)合力不同而進(jìn)行分離純化的。離子交換層析的固定相是離子交換劑，它是由一類不溶于水的惰性高分子聚合物基質(zhì)通過(guò)一定的化學(xué)反應(yīng)共價(jià)結(jié)合上某種電荷基團(tuán)形成的。離子交換劑可以分為三部分：高分子聚合物基質(zhì)、電荷基團(tuán)和平衡離子。電荷基團(tuán)與高分子聚合物共價(jià)結(jié)合，形成一個(gè)帶電的可進(jìn)行離子交換的基團(tuán)。平衡離子是結(jié)合于電荷基團(tuán)上的相反離子，它能與溶液中其它的離子基團(tuán)發(fā)生可逆的交換反應(yīng)。平衡離子帶正電的離子交換劑能與帶正電的離子基團(tuán)發(fā)生交換作用，稱為陽(yáng)離子交換劑；平衡離子帶負(fù)電的離子交換劑與帶負(fù)電的離子基團(tuán)發(fā)生交換作用，稱為陰離子交換劑。
